Интернет-журнал "Домашняя лаборатория", 2007 №5

По мере готовности проинокулируйте скосы фрагментами мицелия. Пометьте каждую пробирку датой, типом агара, видом и штаммом. Для подстраховки сделайте как минимум три скоса на каждый штамм. Инкубируйте в течении недели при температуре 24 °C. Как только мицелий покроет основную поверхность агара и на поверку окажется свободным от заражений, помещайте на хранение при температуре 2–4 °C. При таких температурах снижается метаболическая активность большей части мицелия и практически прекращается поглощение питательных веществ. В идеале неплохо бы проверять жизнеспособность хранимого мицелия каждые полгода, высаживая его фрагменты в новые чашки Петри. После того как мицелий захватит 2/3 поверхности носителя в чашке, отберите сильный (ризоморфный) мицелий и проинокулируйте новые скосы. Подпишите и храните их пока они вам не понадобятся. Зачастую, проращивание такой миникультуры становится хорошей проверкой хранимого штамма на всхожесть и плодовитость.

Превосходным способом сохранения культур является передача дубликатов видов и штаммов знакомым коллегам культиваторам. Штаммы грибов теряются, иногда с большей лёгкостью, чем от них того ожидают. А, потеряв, вы никогда уже не сможете их вернуть.

Вышеописанный метод помогает надёжно сохранять культуры в большинстве случаев. Тем не менее, некоторые алчные культиваторы с лёгкостью могут обзавестись пятидесятью, а то и сотней штаммов и необходимость постоянного поддержания их жизнеспособности может стать утомительной и обременительной. Когда библиотека культур разрастается до таких объёмов, существует несколько дополнительных мер позволяющих увеличить срок хранения штаммов.

Простейший способ консервации культур на долгий срок использует тонкий слой стерильного минерального масла наносимого на живой мицелий после его прорастания в пробирке. Минеральное масло не токсично для мицелия, сильно снижает его метаболизм и препятствует испарению влаги из агаровой основы. После этого культура хранится при 3–5 °C до востребования. Недавние исследования (Perrin, 1979) показали, что все 30 видов грибов хранимых под минеральным маслом на протяжении 27 лет произвели живой мицелий. Для возобновления штаммов скосы были перевёрнуты вверх ногами для того чтобы стекло масло, и затем инкубированы при 25 °C. В течение трёх недель каждый скос показал обновлённые признаки роста и, будучи перенесёнными на агар, дали незаражённые культуры.

Четыре других способа консервации включают: погружение скосов в жидкий азот (дорогостоящая процедура); инокуляция стерильного компоста на основе конского навоза и соломы с последующим хранением при 2–3 °C (см. Главу V о приготовлении компоста); инокуляция носителя на основе опилок и отрубей мицелием грибов предпочитающих дерево (см. Главу III об альтернативных носителях мицелия); или хранение спор в тёмном прохладном месте — возможно наипростейший способ для домашних культиваторов.

Независимо от используемого способа консервации помните, что для грибов естественно плодоносить, спорулировать и развиваться. Методы культивации должны развиваться вместе с грибами и культиватор должен выборочно изолировать и поддерживать многообещающие штаммы по мере их появления. Так что не удивляйтесь, если спустя пять лет хранения, штамм слабо похож на оригинальный по характеристикам плодоношения и форме.

ГЛАВА 3. РАБОТА С ЗЕРНОМ

РАЗВИТИЕ ТЕХНОЛОГИИ ВЫРАЩИВАНИЯ ЗЕРНОВОЙ ГРИБНИЦЫ

Зерновая грибница используется для инокуляции приготовленного субстрата. Она состоит из материала-носителя полностью колонизированного мицелием. Тип носителя зависит от вида культивируемых грибов, хотя большинство изготовителей зерновой грибницы выбирают рожь. История развития способов приготовления инокуляционного материала для выращивания Agaricus brunnescens наглядно демонстрирует прогресс в этой области за последние 100 лет.

В 19 веке культиваторы Agaricus получали инокуляционный материал собирая его в естественных условиях произрастания. Далее такую «девственную грибницу» дополняли такими же естественными питательными материалами, в данном случае конским навозом. Также иногда использовался отработанный субстрат от предшествующих заходов. Такого рода инокуляционный материал содержал большое количество контаминантов и паразитов, в результате урожай получался небольшим. Для перехода к более серьёзному, коммерчески выгодному выращиванию грибов необходимо было разработать методики гарантирующие получение качественного мицелия в больших количествах.

Появление техник работы с чистой культурой, размножение мицелия путём проращивания спор или клонирования ткани грибов сменило собой использование дикорастущей грибницы. С этого момента культиваторы смогли быть уверенными не только в качестве инокуляционного материала, но и с некоторой долей достоверности прогнозировать свойства штамма. Впервые в истории появилась возможность селекции и развития высокоурожайных штаммов благодаря возможности сохранения культуры на специально приготовленном субстрате. Стерилизованный, мелкопорубленный компост стал наиболее предпочитаемым носителем исходной чистой культуры и на годы вперёд стал стандартом индустрии производства Agaricus.

В 1932 г. доктор Джеймс Синден запатентовал процесс приготовления инокуляционного материала использующий зерно как носитель мицелия. С тех пор наиболее используемым зерновым злаком стала рожь, хотя также использовали и просо, и пшено, и пшеницу. Новаторский подход Синдена установил новый стандарт изготовления зернового мицелия и сформировал базу современной индустрии. Ощутимое преимущество зернового мицелия заключается в увеличенном количестве точек инокуляции. Каждое отдельное зёрнышко становится такой точкой, от которой может разрастаться мицелий. Таким образом, литр грибницы на ржи, содержит приблизительно 25 тысяч зёрен, и представляет собой неоспоримое превосходство над более грубым инокуляционными материалами.

Ниже перечислены злаковые крупы пригодные для приготовления грибницы. Непосредственно за этим списком следует таблица, иллюстрирующая некоторые физические свойства важные для приготовления субстрата.

РИС: используют немногие культиваторы, даже придерживаясь правильных уровней влажности трудно избежать слипания отдельных зёрен, в виду клейких свойств внешнего покрытия

ПРОСО: хотя предоставляет большее количество точек инокуляции, чем рожь, немного сложнее на его основе изготовить носитель грибницы. Amycel (компания изготовитель зерновой грибницы) разработала формулу приготовления проса и использует его как основной носитель для приготовления коммерческих образцов субстрата.

СОРГО: обладает зёрнами круглой формы и работает относительно неплохо как носитель грибницы, но его сложно раздобыть.

ПШЕНИЦА: одинаково хороша для приготовления грибницы и выращивания плодовых тел.

СЕМЕНА ПЫРЕЙЯ и РАЙГРАСА (знать бы, что это такое — прим. ред.): оба обладают большим количеством ядрышек на грамм, чем зерно. Минусы использования этих семян заключаются в их склонности терять влагу и неспособности разбиваться на отдельные ядрышки, отчего их сложно встряхивать (семена пырейя и райграса широко используются для развития склероций Psilocybe tampanensis, Psilocybe mexicana и Psilocybe armandii. Могут быть использованы годовалые и многолетние семена, хотя годовалые более дёшевы. Дополнительные параметры по этим видам грибов смотрите в 11-й главе этой книги)

РОЖЬ: доступность, низкая стоимость и хорошая способность разделятся на отдельные зёрна, являются свойствами, позволяющими рекомендовать её для использования в качестве субстрата для выращивания мицелия и плодоношения.

В одном единственном грамме с/х ржи (Secale cerealе) по приблизительным оценкам количества отдельных клеток присутствуют 50'000–100'000 бактерий, более 200'000 актиномицетов, 12'000 грибков и плесеней, а также большое количество дрожжей. Таким образом стерилизация уничтожает приблизительно 300'000 контаминантов! В банке с зерном, весом превышающим сто грамм, с добавлением воды количество клеток в популяциях живых организмов достигает астрономических высот. Из всех десяти групп таких организмов бактерии являются наиболее пагубными. В таких условиях одна единственная бактерия размножается до более чем миллиона экземпляров за менее чем десять часов. Ещё за десять часов каждая из этих бактерий произведёт ещё по миллиону копий.