Интернет-журнал "Домашняя лаборатория", 2007 №5
Шрифт:
Если только маленькая толика всех этих микроорганизмов переживёт стерилизацию, они смогут превратить зерно в бесполезную массу всего за несколько дней.
Большинство микроорганизмов уничтожаются во время стерилизации. Для жидкостей стандартное время паровой стерилизации составляет 25 минут при давлении в 1,05 атмосферы или 15 psi (120 °C). Для твёрдых объектов, таких как рожь, время стерилизации следует увеличить, чтобы позволить пару проникнуть во все воздушные карманы и впадины свойственные структуре зёрен. В пределах этих углублений бактерии и другие термостойкие организмы, будучи защищены от разрушающего воздействия пара, получают лучшие шансы пережить короткий период стерилизации, нежели долгий. Следовательно, полный час — это минимально рекомендуемое время стерилизации банок с зерном.
Некоторые партии зерна имеют необычайно высокое содержание бактерий и плесеней. Уровень контаминации такого зерна остаётся относительно
После того как зерно было простерилизовано можно считать, что все конкуренты нейтрализованы. Следующим наиболее вероятным источником контаминации может послужить воздух, непосредственно окружающий банки. По мере того как банки остывают они засасывают воздух вместе с воздушными контаминантами. Если содержание вредоносных спор во внешней среде достаточно высоко, некоторые из них будут внесены в субстрат ещё даже до первой инокуляции! В обычной комнате в одном кубическом метре содержится приблизительно 350'000 частиц, размер которых превышает 0,3 микрона (это пыль, споры и пр.), тогда как в «стерильной» лаборатории приблизительно 3'500. Зная об этих фактах, вы можете провести ещё две следующих процедуры, которые позволят снизить шанс заражения:
1. Если вы стерилизуете зерновой субстрат вне лаборатории в нестерильных условиях (на кухне к примеру), не забудьте начисто вымыть скороварку до того как перенесёте её в стерильную инокуляционную комнату.
2. Инокулируйте банки, как только они достигнут комнатной температуры, несмотря на то, что многие культиваторы оставляют банки на ночь в скороварке, это является нежелательным.
Объём воды, добавляемый в зерно, является очень важным фактором влияющим на вероятность заражения. Излишняя влага в банке с грибницей способствует размножению бактерий и других конкурентов. На влажном зерне грибной мицелий уплотняется и замедляется в росте. Переувлажнённые зёрна взрываются в процессе стерилизации, а внутренняя часть зерна ещё больше подвержена заражению. Также влажное зерно, сплетённое мицелием, слипается и его трудно разделить между собой. Когда такое зерно вступает в контакт с нестерильными субстратами, например компостом, оно чаще становится причиной заражения. С грибницей, уровень влажности которой сбалансирован, таких проблем не возникает. Она легко разделяется на отдельные зерна, покрытые мицелием, увеличивая тем самым количество точек инокуляции, каждая из которых становится источником роста сети мицелия.
Определить точную влажность зерна несложно. Единожды высчитав её для имеющегося зерна, культиватор будет точно знать какое количество воды надо добавить в зерно. Находящаяся в продаже рожь для проращивания содержит 11 % воды от общей массы (±2 процента). Точное содержание влаги в зерне можно просто подсчитать, отняв вес зерна просушенного в духовке (3 часа при 120 °C) от исходного его веса. Полученная цифра и есть естественная доля влаги в зерне.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ЗЕРНОВОЙ ГРИБНИЦЫ
Оптимальная влажность зерна для приготовления субстрата для грибницы находиться между 49–54 %. Нижеследующие составы используют хлебную рожь, обычная влажность которой составляет 11 %. Следует ожидать некоторых отклонений зависящих от производителя, размера ядра, географии произрастания и условий хранения зерна.
Стандартными ёмкостями для грибницы для домашнего культиватора можно считать литровые банки, а для крупных производителей 4-х литровые. Домашние культиваторы также широко использовали банки с широким горлом, благодаря нескольким книгам популяризирующим плодоношение прямо в этих банках. Предполагалось, что из банок с широким горлом урожай собирать легче, чем из обычных. Но не только этот метод непрактичен как устаревший, но и банки с широким горлом имеют несколько серьёзных недостатков и, таким образом, не могут быть рекомендованы к использованию. Стандартные банки с узким горлом дают воздушным контаминантам меньше возможностей проникнуть внутрь и на их крышках проще использовать синтетические фильтрующие диски. Назначение контейнера для грибницы — дать временный приют и создать благоприятные условия для развития мицелия, до того как он будет выложен в лотки или использован для инокуляции бедных субстратов. Банки не очень хорошо подходят для использования в качестве контейнера при плодоношении. Многие промышленные производители грибницы используют синтетические диски в качестве фильтров, которые обеспечивают проникновение воздуха и свободный газообмен, но задерживают вредоносные споры. Домашние же культиваторы используют не полностью закрученные резьбовые крышки, которые пропускают некоторое количество воздуха. Такой способ неплохо работает в условиях близких к стерильным, но не обеспечивает никакой защиты. Лучшим вариантом была бы крышка с просверлённым
в ней отверстием диаметром 9-12 мм, прикрытым фильтром (лучше с отверстием побольше, заткнутым ватной пробкой — прим. ред.). Лично авторы находят использование 2 л банок идеальным вариантом. (Заметьте, что такие банки следует инокулировать путём переноса зерна из мастер-банки — техника, которая будет объяснена ниже в данной главе). Использование фильтра на весь размер крышки у банок с широким горлом не рекомендуется, в связи с повышенным уровнем испарения влаги из зерна.
Чтобы получить зерно с влажностью 48–52 % используйте смеси, приведённые ниже, и автоклавируйте в скороварке 1 час при давлении 1,05 атмосферы (15–18 psi). Примите во внимание, что столовые мерные чашки не достаточно точны и ошибка может достигать 10 % от объёма. Проверьте вашу мерную чашку специальным градуированным цилиндром. Выяснив точность, используйте мерную чашку для зерна и мерную чашку для воды для соблюдения пропорций приведённых ниже:
СМЕСИ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ЗЕРНА
ДЛЯ ЛИТРОВЫХ БАНОК
1 чашка ржи 2/3 — 3/4 чашки воды (или приблизительно)
240 мл ржи 170–200 мл воды
ДЛЯ 2-Х ЛИТРОВЫХ БАНОК
3 чашки ржи 1 и 3/4 чашки воды (или приблизительно)
600 мл ржи 400–460 мл воды
Данные смеси позволяют добиться заполнения банки на 2/3 после автоклавирования. В качестве добавки к этим формулам можно использовать мел/известь (СаСО3) и гипс (CaSО4) в пропорции 1–3 части по весу к 100 частям зерна (сухой вес). Соотношение мела и гипса 1:4. Добавление этих ингредиентов в субстрат опционально для большинства видов, но необходимо при выращивании Agaricus brunnescens. В варианте с использованием известкового буфера к формулам стоит добавить ещё 10 % воды.
После того как заполненные по формуле банки были автоклавированны, их следует перенести в стерильную комнату и остудить до комнатной температуры.
До момента внесения банок в стерильную комнату окружающий воздух следует обеззараживать используя стандартные методы дезинфекции или НЕРА-фильтры (или и то и другое).
Вынув банку из скороварки или автоклава её следует перетряхнуть для того чтобы разрыхлить зерно и перемешать сухие и влажные зёрна. Перетряхивание также позволяет избежать слипания зерна на дне банки.
Превосходным инструментом упрощающим процедуру перетряхивания может послужить лысая автопокрышка или обитый стул. Тщательно очищенная и продезинфицированная шина должна быть установлена в вертикальное и устойчивое положение. Поверхность покрышки идеально подходит для соударения при перетряхивании, уменьшает дискомфорт для рук и позволяет избежать травм, если банка разобьётся. Шина будет использоваться и на других стадиях развития зерновой культуры, так что мойте её регулярно. В тех же целях промышленные производители зерновой грибницы используют мешалки для краски, но это неприемлемо в домашних условиях.
ВНИМАНИЕ: ВСЕГДА ПРОВЕРЯЙТЕ БАНКИ НА ПРЕДМЕТ НАЛИЧИЯ ДЕФЕКТОВ ПЕРЕД ПЕРЕТРЯХИВАНИЕМ.
Когда банки достигли комнатной температуры можно начинать инокуляцию зерна мицелием с агара. Ещё раз: очень важно соблюдение хорошей гигиены. При переносе мицелия с агара на зерно добавляется ещё одно измерение в котором могут распространятся контаминанты. На агаре мицелий захватывает двухмерную плоскую поверхность и легко заметить заражение, если оно присутствует. На зерне в игру вступает добавляемое измерение глубины и контаминанты становятся более неуловимыми, часто ускользающими от распознания даже внимательным и проницательным глазом. Не будучи замеченными, контаминанты получают возможность распространится, когда данной грибницей будет инокулировано новое стерильное зерно.
Перед проведением пересадки примите все предосторожности и убедитесь в стерильности окружающей среды, в которой проводится инокуляция. После чистки комнаты не рискуйте её чистотой, входя в неё в грязной одежде. К сожалению лишь немногие культиваторы принимают во внимание тот факт, что они сами являются главным источником инфекции. На самом деле само человеческое тело суть среда, кишащая бактериями и микроскопическими клещами, усеянная спорами плесеней и семенами растений.
Только убедившись, что соблюдены все условия чистоты, можно приступать к производству грибницы.