Интернет-журнал "Домашняя лаборатория", 2007 №9

Заметьте, что для инокуляции субстрата с перекисью следует использовать только адаптированный к перекиси мицелий, т. е. мицелий, выращенный на перекисесодержащем агаре. В противном случае, не адаптированный мицелий может погибнуть, или же для начала его роста потребуется слишком много времени, т. к. мицелий столкнется с перекисью в относительно высокой концентрации, которая обусловлена предлагаемой рецептурой для посевного субстрата. Вместе с тем, основной субстрат с перекисью содержит последнюю в гораздо меньшей концентрации и поэтому может быть безопасно инокулирован посевным мицелием, не адаптированным к перекиси.

Первоначально я помещал банки после инокуляции в свежие пластиковые пакеты, завязывая их на узел (я делал это немедленно после протирания банок спиртом). Я использовал пластиковые пакеты для того, чтобы обеспечить неподвижность окружающего банки воздуха и уберечь банки от приблудившихся грибных комариков (пакеты можно использовать повторно, если они не загрязнены). Позже я стал помещать банки на инкубацию без пакетов и это не оказало на конечный результат никакого отрицательного влияния.

В заключение я удостоверяюсь, что банки закрыты должным образом и оставляю их на несколько дней, пока мицелий не начнет осваивать окружающее пространство. Разлагающаяся перекись обеспечивает мицелий кислородом, поддерживая его рост на этом этапе, а уровень углекислого газа в это время еще не слишком высок. Когда ореол мицелия достигает сантиметра в поперечнике, я перетряхиваю субстрат. Через несколько дней в субстрате появляется множество новых точек роста (не затягивайте слишком с перетряхиванием субстрата, т. к. вместе с ростом ореола мицелия вокруг кусочка агара, количество перекиси, защищающего субстрат, постоянно уменьшается). Раньше я ослаблял крышку на банке после перетряхивания, чтобы обеспечить некоторый газообмен, но сейчас я считаю, что в этом нет необходимости. Картонный диск, очевидно, обеспечивает газообмен в достаточной степени, даже если крышка плотно закрыта.

Посевной мицелий готов к использованию, если он не очень плотно, но полностью освоил всю массу субстрата. Я обычно жду, когда мицелий начнет расти над поверхностью субстрата (на полсантиметра или более) и только после этого использую содержимое банки для инокуляции.

Если вы используете не банки, а пакеты с субстратом, порядок действий остается в основном тем же. Вам не нужно беспокоиться о попадании контаминантов в охлажденные пакеты, так как любые микроорганизмы, попавшие внутрь, будут уничтожены перекисью.

Что я думаю об использовании перекиси для приготовления жидких культур? Я не рассматривал такую возможность по двум причинам. Во-первых, любой метод инокуляции жидкой среды подразумевает перемешивание прививочного материала (или, в некоторых других способах, разламывание мицелия), что высвобождает в процессе инокуляции заметное количество перекисеразрушающих ферментов, попадающих в среду. Во-вторых, даже если предположить, что с первой проблемой можно справиться, я предвижу быстрое снижение концентрации перекиси в жидкой среде, потому что в ней будет циркулировать нетронутый грибной материал, содержащий внутри себя перекисеразрушающие ферменты. На твердых субстратах мицелий осваивает ограниченный участок, а концентрация перекиси на нетронутой среде остается на желаемом уровне. Уменьшение количества перекиси может быть восполнено ее регулярным добавлением, но это может потребовать методики измерения концентрации перекиси в очень разбавленных растворах.

Колонизация основного субстрата

Колонизация основных, плодоносящих субстратов — это третья стадия в процессе грибного культивирования, ведущая напрямую к производству съедобных грибов.

В связи с тем, что раствор перекиси так дешев, экономически выгодным является добавление достаточного количества перекисного раствора в плодоносящие субстраты, чтобы защитить их от заражений. С технической точки зрения это означает, что можно выращивать некоторые виды дереворазрушающих грибов без применения автоклавирования для стерилизации субстрата. С другой стороны, методики, о которых говорится в этом томе, предусматривают использование субстратов, не содержащих перекисеразрушающих ферментов. Перекись не даст заметных преимуществ (или не даст вовсе) на субстратах, которые все еще обладают значительной биологической активностью, таких, как компост, пастеризованная солома или свежие древесные опилки, обработанные в кипящей воде.

Первый материал, который я нашел идеальным для использования с перекисью, был гранулированным топливом для печей, работающих на прессованных опилках. Такой субстрат проходит предварительную термообработку и поэтому не вызывает разложения перекиси даже без автоклавирования. В этой связи, гранулированное топливо может быть легко пастеризовано при помощи кипящей воды для дальнейшего использования в качестве основного субстрата. Добавление воды одновременно обеспечивает необходимую влажность содержимого (когда вы добавляете кипящую воду к опилочным гранулам, они превращаются в опилки, из которых и были первоначально сделаны). Опилочные гранулы из древесины твердых пород являются, в общем случае, наилучшим выбором для большинства дереворазрушающих грибов, хотя гранулы, сделанные из еловых опилок тоже могут подойти (я подозреваю, что тепловая и механическая обработка, используемые при изготовлении гранулированного топлива, могут разрушать некоторые из смол, содержащихся в ели и являющихся ингибиторами роста мицелия). Проверьте, чтобы выбранные гранулированные опилки не содержали каких-либо добавок типа полимерного связующего (в большинстве случаев, добавок нет).

Другой субстрат, который я использовал с перекисью — это гранулированная бумага вторичной переработки. В моей местности такой материал продается как Crown Animal Bedding ТМ (подстилка для животных) и Good Mews ТМ Cat Litter (подсыпка для кошек). Эти продукты проходят двойную санитарную термическую обработку (согласно информации из буклетов). Даже без добавления воды, указанные гранулы имеют начальную влажность около 30 %. Как и в случае с гранулированным топливом, этот материал не содержит остаточных перекисеразрушающих ферментов. Недостатком в данном случае является цена, которая для подстилки для животных обычно в три раза выше, чем для гранулированного топлива, если считать по сухому весу.

Если в вашей части земного шара не удается приобрести гранулированной бумаги или гранулированных опилок, вам стоит обратить внимание на одну из методик приготовления субстрата, представленных во втором томе. Эти методики предусматривают использование в качестве субстрата большого количества доступных материалов, включая и те, которые содержат перекисеразрушающие ферменты. Пожалуй, единственный материал, который НЕ БУДЕТ работать ни с одной из перекисных методик, это сырые, свежие опилки, т. е. опилки, производимые на пилорамах из свежего леса.

Если у вас имеется другой субстрат, который вы хотели бы использовать с перекисью, скажем, бумажные или картонные отходы, и вы планируете пастеризовать его, а не автоклавировать, то вам придется удостовериться в отсутствии перекисеразрушающих ферментов в субстрате после пастеризации. Для проверки вы можете просто поместить небольшое количество субстрата в чашку и добавить некоторое количество 3 % раствора перекиси. Если сразу после этого ничего не произойдет, подождите в течение некоторого времени. Если в субстрате присутствуют перекисеразрушающие ферменты, смесь начнет пузыриться и пениться. Если все ферменты уничтожены, смесь не будет отличаться от субстрата, смешанного с во-

Состав плодоносящих субстратов может отличаться от одного вида гриба к другому. Большинство рецептов для дереворазрушающих грибов включают опилки (которые мы будем получать из гранулированного топлива), как минимум 1 % молотой извести, воду в количестве, обеспечивающем окончательную влажность в районе 60–65 %, и 5-20 % (по сухому весу) какой-либо добавки в качестве источника азота, например, рисовых отрубей (они обеспечивают общий уровень азота в пределах 0.1–0.4 %).

Более высокие уровни азота в обогащенных опилках обычно позволяют повысить урожайность грибов, но вместе с тем, традиционно считается, что высокий уровень азота повышает и риск заражения. При использовании перекиси, опасность заражения, вследствие повышении уровня азота, может и не возрастать заметным образом. Тем не менее, чтобы не искушать судьбу, я редко увеличиваю уровень азота выше значения 0.4 %.